1材料與方法

1.1標(biāo)本來源

均為無償獻(xiàn)血者的血清標(biāo)本。

1.2試劑

梅毒試劑為上?？迫A生物工程有限公司和北京華大吉比愛生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。

1.3儀器TECANRSP加樣器。

【關(guān)鍵詞】全自動

全自動樣品處理儀已經(jīng)在各大血站廣泛應(yīng)用，筆者在應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)梅毒實驗出現(xiàn)強(qiáng)陽性標(biāo)本污染后排孔現(xiàn)象，而手工復(fù)查后排孔標(biāo)本的試管和小辮均為陰性，現(xiàn)報告如下。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來源

均為無償獻(xiàn)血者的血清標(biāo)本。

1.2試劑

經(jīng)大量臨床病例證實，消化系統(tǒng)的胃黏膜病變、潰瘍、胃淋巴增生性病變、慢性胃炎甚至胃癌均與幽門螺桿菌(HP)感染有一定的關(guān)系。我國目前處于HP感染高發(fā)區(qū)，通常HP感染缺乏典型的臨床特征，故早期的臨床診斷及治療顯得尤為重要。病理診斷HP感染是臨床診斷的重要依據(jù)，但在常規(guī)病理HE切片中不易觀察到HP，難以明確病理診斷，因此只能用特殊染色法才能使HP更清晰的顯示出來。目前檢測HP的方法有10余種，哪些方法最好、如何進(jìn)行HP染色的質(zhì)量控制、使染色結(jié)果穩(wěn)定可靠且準(zhǔn)確是目前工作中的關(guān)鍵。本文就這些染色法中的關(guān)鍵問題、注意事項以及HP實驗操作問題、染色液配制及染色結(jié)果觀察判斷等問題進(jìn)行探討。

1材料與方法

1.1材料。選取本院2018-05—08間臨床診斷的活動性胃炎胃黏膜活檢標(biāo)本65例。1.2方法。將65例石蠟標(biāo)本連續(xù)切片，制成4μm厚的切片，每例取3張，分別進(jìn)行硼酸亞甲藍(lán)染色、改良Giemsa染色和硝酸銀染色。1.2.1試劑配制①硼酸亞甲藍(lán)染液配制:把1g亞甲藍(lán)和1g硼酸加入100ml蒸餾水中充分混合溶解。②改良Giemsa染液配制:Giemsa染液:Giemsa染液0.75g加甲醇50ml于50度水浴箱中使其充分溶解，其間不斷攪拌，冷卻后加入50ml甘油;石炭酸復(fù)紅液:堿性品紅50mg溶于95%乙醇100ml，再加入4%苯酚250ml及蒸餾水650m，充分混合即可。③硝酸銀液配制:醋酸貯備液:雙蒸餾水加1%檸檬酸液，調(diào)節(jié)PH值為3.6～4.0之間;5%明膠液:明膠5g加醋酸貯備液100ml溶解;③顯影液:3%對苯二酚1ml與5%明膠15ml充分混合，顯影前5min加入2%硝酸銀3ml混合。1.2.2染色步驟①硼酸亞甲藍(lán)染色:切片脫蠟至水，硼酸亞甲藍(lán)染液染色5min，水洗，烘干切片，中性樹膠封固。②改良Giemsa染色:組織切片脫臘至水，改良Giemsa染液染色20min后水洗，石炭酸復(fù)紅液染1min，不洗直接用無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。③硝酸銀染色:切片脫蠟至水，醋酸貯備液洗切片，把切片置入1%硝酸銀于56℃水浴箱45min，切片取出不經(jīng)水洗，滴入顯影液56℃水浴反應(yīng)2min，切片立即取出，自來水稍洗，無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。1.3結(jié)果判定。切片高倍鏡下，陽性的幽門螺桿菌形態(tài)彎曲，短桿狀，分布在胃黏膜凹陷內(nèi)。硼酸亞甲藍(lán)染色法幽螺桿菌呈藍(lán)色;改良Giemsa染色法幽門螺桿菌呈紅色;硝酸銀染色法幽門螺桿菌呈棕黑色。

2結(jié)果

65例胃黏膜標(biāo)本中，經(jīng)硼酸亞甲藍(lán)檢出55例HP陽性，陽性率85%(圖1);經(jīng)Giemsa染色49例陽性，陽性率75%(圖2);經(jīng)硝酸銀染色檢出52例陽性，陽性率80%(圖3)。三項染色陽性的數(shù)據(jù)比較差別顯著(P＜0.05)。

3討論

摘要:目的驗證以問題為基礎(chǔ)(PBL)教學(xué)法在提高學(xué)生處理聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)污染能力方面的作用。方法以PCR假陽性為實例,采用PBL教學(xué)法引導(dǎo)學(xué)員合理設(shè)立空白對照,通過重復(fù)試驗探究污染來源。結(jié)果學(xué)員在思維引導(dǎo)幫助下逐步發(fā)現(xiàn)PCR污染來源于引物污染,并對試驗方法及理論有了清晰的認(rèn)識。結(jié)論以實例講解為基礎(chǔ)的PBL教學(xué)法可有效提高學(xué)生認(rèn)識和處理PCR污染的能力。

關(guān)鍵詞:以問題為基礎(chǔ)教學(xué)法;實例講解;定量聚合酶鏈反應(yīng);引物污染

隨著生物科技的發(fā)展,以聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)為主的核酸試驗應(yīng)用越來越廣泛[1],實驗室質(zhì)量控制和生物安全是PCR技術(shù)初學(xué)者應(yīng)掌握的重要內(nèi)容[2]。不論是中學(xué)、大學(xué)實驗課的學(xué)生還是實驗技術(shù)方面的初學(xué)者對避免核酸污染等質(zhì)量控制的意識均不強(qiáng)。由于PCR耗時較長,注意力不易集中[3],容易受核酸污染,必須設(shè)計空白對照才能及時發(fā)現(xiàn)假陽性結(jié)果[4],但枯燥的理論講解學(xué)生不易接受,教學(xué)效果不好。以問題為基礎(chǔ)(PBL)教學(xué)法是一種基于“問題”為中心的教學(xué)模式,是目前國際上較為流行的一種教學(xué)法。案例選擇和問題設(shè)計是PBL教學(xué)法的主要切入點,對初學(xué)者理解抽象問題非常有幫助。本文圍繞在一次PCR教學(xué)試驗中發(fā)現(xiàn)空白對照管中有核酸污染的實例,遂把PBL教學(xué)法應(yīng)用于枯燥的對照重復(fù)試驗,理清了發(fā)現(xiàn)和判定核酸污染來源的過程,學(xué)生們反映教學(xué)效果很好,理解較為深刻。

1資料與方法

1.1學(xué)生情況及試驗事件

小班教學(xué),學(xué)生5人,教學(xué)過程發(fā)現(xiàn)空白對照管有核酸擴(kuò)增,于是采用PBL教學(xué)法[5],以實例為引導(dǎo),設(shè)計教學(xué)試驗,結(jié)合實際圖表,啟發(fā)學(xué)生分層思維,最終引導(dǎo)學(xué)生們找到污染源。

摘要：牛結(jié)核病是一種人獸共患的傳染病，它不僅影響奶牛養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，更重要的是由于交叉感染，而使人類的健康受到威脅，因而，要從根本上控制牛結(jié)核病的發(fā)生與流行，從加強(qiáng)對本病的檢疫與監(jiān)測工作入手，制定有效的防制措施。

關(guān)鍵詞：牛結(jié)核??；臨床診斷；防制措施

結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的人畜共患傳染病，也是牛群中最常見的一種慢性傳染病。在臨床上以病牛貧血、消瘦、體虛乏力、精神萎靡不振和生產(chǎn)力下降等為特征。在牛的多種組織器官上形成結(jié)核結(jié)節(jié)和干潞樣鈣化病灶。

1病原

結(jié)核病病原菌為結(jié)核分枝桿菌，分為3型，即人型、牛型和禽型。其中以牛型對奶牛群致病力最強(qiáng)。牛型分枝桿菌長1~4微米，寬0.3~0.6微米，單個或呈鏈狀排列，為革蘭氏陽性桿菌，具有抗酸染色特性。對外界環(huán)境的抵抗力很強(qiáng)，抗干燥，在干涸的分泌物中可存活6~8個月，在糞便中可存活數(shù)個月，在污水中也能存活11~15個月。不耐熱，60℃20~30分鐘即被殺死。10％漂白粉溶液和70％~90％酒精溶液消毒效果較好。本病菌對鏈霉素、異煙肼噸對氨水楊酸鈉、環(huán)絲氨酸和利福平等藥物，具有不同程度的敏感性。對青霉素、磺胺類藥物以及其他廣譜抗生素都不敏感。

2流行病學(xué)

摘要：牛結(jié)核病是一種人獸共患的傳染病，它不僅影響奶牛養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，更重要的是由于交叉感染，而使人類的健康受到威脅，因而，要從根本上控制牛結(jié)核病的發(fā)生與流行，從加強(qiáng)對本病的檢疫與監(jiān)測工作入手，制定有效的防制措施。

關(guān)鍵詞：牛結(jié)核病；臨床診斷；防制措施

結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的人畜共患傳染病，也是牛群中最常見的一種慢性傳染病。在臨床上以病牛貧血、消瘦、體虛乏力、精神萎靡不振和生產(chǎn)力下降等為特征。在牛的多種組織器官上形成結(jié)核結(jié)節(jié)和干潞樣鈣化病灶。

1病原

結(jié)核病病原菌為結(jié)核分枝桿菌，分為3型，即人型、牛型和禽型。其中以牛型對奶牛群致病力最強(qiáng)。牛型分枝桿菌長1~4微米，寬0.3~0.6微米，單個或呈鏈狀排列，為革蘭氏陽性桿菌，具有抗酸染色特性。對外界環(huán)境的抵抗力很強(qiáng)，抗干燥，在干涸的分泌物中可存活6~8個月，在糞便中可存活數(shù)個月，在污水中也能存活11~15個月。不耐熱，60℃20~30分鐘即被殺死。10％漂白粉溶液和70％~90％酒精溶液消毒效果較好。本病菌對鏈霉素、異煙肼噸對氨水楊酸鈉、環(huán)絲氨酸和利福平等藥物，具有不同程度的敏感性。對青霉素、磺胺類藥物以及其他廣譜抗生素都不敏感。

2流行病學(xué)論文

【摘要】目的研究本地區(qū)海洛因依賴者肝臟損傷與HCV、HBV感染關(guān)系及人群分布。方法對182例依賴者肝功能、HCV、HBV感染及相互關(guān)系進(jìn)行檢測分析。結(jié)果HCV、HBV感染較普通人群明顯增高，陽性率分別為36%和30.9%。HCV、HBV重疊感染占17.6%。靜脈注射者HCV、HBV單項或重疊感染較燙吸明顯增高。常用肝功指標(biāo)僅ALT和AST兩項異常。結(jié)論海洛因依賴者肝臟損傷指標(biāo)以ALT和AST異常為主。嗜肝病毒感染（HCV、HBV）加重肝臟損傷，尤以重疊感染為甚。靜脈吸毒，共用注射器是HCV、HBV感染重要因素。應(yīng)加強(qiáng)對高危人群的宣教工作，及早戒毒。

【關(guān)鍵詞】依賴者；HCV、HBV；肝臟損傷；人群分布；吸食方式

吸毒已成為世界性公害，的依賴對人體造成嚴(yán)重危害。近年本地區(qū)吸毒者呈上升趨勢。分析本地區(qū)吸毒對人體損傷，特別是靜脈注射引起嗜肝病毒（HCV、HBV）感染或雙相重疊感染現(xiàn)象尤為突出。探討的吸入方式、吸食時間長短等因素與肝臟損傷、嗜肝病毒感染的關(guān)系，無論從流行病學(xué)調(diào)查，還是預(yù)防宣傳、教育都有重要的現(xiàn)實意義?，F(xiàn)將182例血清肝功能（12項）和HCV、HBV檢測結(jié)果及臨床資料分析報告如下。

1資料與方法

1.1研究對象均來自我鎮(zhèn)收容所。所有病例均符合DSM-Ⅲ-R阿片依賴診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除其他疾病。其中男101例，女81例，年齡在16～40歲之間，平均28歲。無業(yè)者占76%，高中文化或以下者占81.5%。

1.2濫用情況吸毒年限：2個月～15年不等，平均6.5年。方式：燙吸72人，占39.5%；靜脈注射110人，占60.5%，約30%以上人員承認(rèn)有性亂史或多個性伴侶。

【關(guān)鍵詞】從業(yè)人員HBsAg攜帶統(tǒng)計

【摘要】為了解公共場所服務(wù)行業(yè)人員HBsAg攜帶狀況，強(qiáng)化健康管理，為制定有效的防控措施提供科學(xué)依據(jù)，對公共場所從業(yè)人員168400名健康檢查結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析，現(xiàn)報告如下。

一、對象與方法

1.1檢測對象對公共場所從業(yè)人員共168400人，包括餐飲人員、客房人員、托幼機(jī)構(gòu)、洗浴美發(fā)人員和其他有關(guān)人員進(jìn)行統(tǒng)計。

1.2檢測方法空腹采靜脈血，分離血清待檢，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）方法檢測HBsAg、HBeAg。儀器為MultiskanMS酶標(biāo)儀和ThermoLaBsyestems洗板機(jī)，用北京科衛(wèi)臨床診斷試劑有限公司提供的試劑檢測和上海榮盛生物技術(shù)有限公司提供的試劑復(fù)檢。

二、統(tǒng)計結(jié)果

摘要：為查清白銀市畜間布魯氏菌病流行趨勢，2016—2020年對免疫6個月以上的羊群采樣檢測，與2015年檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行對比，羊布病感染率由2015年的3.43%下降到2020年的0.16%，牛布病感染率由2015年的0.17%下降到2020年的0，病畜存量明顯減少，布病凈化成效顯著，并在分析畜間布病與人間布病感染的相關(guān)性和畜間布病傳播原因、布病防控工作中存在問題的基礎(chǔ)上，對今后布病防控工作提出了建議。

關(guān)鍵詞：白銀市；布??；流行趨勢；監(jiān)測；防控

1畜間布病流行狀況

近年來，隨著交通運輸?shù)目焖侔l(fā)展，動物大量跨區(qū)域流動[1]，白銀市畜間布魯氏菌病（以下簡稱布?。┏霈F(xiàn)反彈。2013—2015年研究組以人感染布病所在村羊只和與疫區(qū)有密切往來的羊只為重點，在白銀市相關(guān)區(qū)域開展畜間布病檢測（表1）。檢測結(jié)果表明：2015年羊布病檢出率達(dá)3.43%，牛布病檢出率達(dá)0.17%，陽性檢出率呈上升趨勢。針對畜間布病檢出陽性率較高、分布范圍廣的情況，從2016年開始，白銀市全面開展“免、檢、消、殺、管”等綜合防控工作。2016—2020年，每年對全市羊只用布氏菌病活疫苗進(jìn)行一次全覆蓋免疫，5年累計免疫羊763萬只（次），平均免疫密度85%以上。本研究組每年對免疫時間超過6個月的羊群按比例檢測，對從外地引進(jìn)的種畜、感染布病的養(yǎng)殖戶、患病畜的同群畜、奶牛場實行“五個100%”檢測，5年時間在所轄縣區(qū)采集羊血清448851份，檢出陽性羊4411只，個體陽性率0.98%；檢測牛血清16401份，檢出陽性牛4頭，個體陽性率0.02%（表2）。檢測結(jié)果表明：全市羊、牛布病陽性檢出率分別從2015年的3.43%、0.17%下降到2020年的0.16%和0，陽性數(shù)量明顯減少，凈化成效顯著。從分布區(qū)域看，原來布病較重的靖遠(yuǎn)、景泰、平川病畜陽性率顯著降低，其他兩個縣（區(qū)）也呈穩(wěn)步下降態(tài)勢（表3、表4）。

2畜間布病防控與人間布感染的相關(guān)性分析

從白銀市衛(wèi)生部門了解到，2015年白銀市新增布病感染病例503人，基層防疫人員縣、鄉(xiāng)兩級沒有人員感染，村級1人；2016—2020年新增人間患病人數(shù)逐年下降，2015年感染布病病例503人，2020年感染布病病例309人，2020年新增人間病例比2015年減少194人（表5）。人間布病感染率總體呈下降趨勢，與畜間布病成正相關(guān)。通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)，人感染布病的，大多是散養(yǎng)戶，防護(hù)意識淡薄，飼養(yǎng)過程不佩戴口罩、手套、專用防護(hù)服等防護(hù)用品[2]，未對圈舍進(jìn)行定期消毒等。鄉(xiāng)村兩級防疫員感染布病概率有上升趨勢，一方面，可能是鄉(xiāng)村防疫人員自我防護(hù)意識和消毒意識不強(qiáng)；另一方面，可能是疫苗免疫逐年增加，在免疫過程中導(dǎo)致防疫人員感染[3]。

病毒性肝炎是我國的常見傳染病，發(fā)病率高，我國受感染人數(shù)達(dá)7億以上，不僅直接影響人群的健康，甚至還危及人的生命安全。其所造成的直接和間接的經(jīng)濟(jì)損失極大[1，2，3]，嚴(yán)重地影響了生產(chǎn)、工作和學(xué)習(xí)。

乙型肝炎主要是通過輸血及血制品、不潔注射及圍產(chǎn)期母嬰垂直傳播感染的。據(jù)血清流行病學(xué)調(diào)查，我國人群的乙肝表面抗原（HBsAg）攜帶率為10％，約1．2億人，其中1／4的人最終將發(fā)展為慢性肝病，包括慢性肝炎、肝硬化和肝癌。我國現(xiàn)有慢肝患者1200萬，每年死于肝病者約30萬，其中半數(shù)為肝癌。

1醫(yī)源性傳播

醫(yī)源性傳播是乙型肝炎的重要傳播途徑之一。它主要是通過輸血及血液制品，或被患者的血液、體液污染的醫(yī)療器械及其他物品，或意外地接觸污染的血液和體液等途徑，在醫(yī)療活動中使乙肝病毒經(jīng)皮膚或粘膜進(jìn)入人體而感染[4，5]。有報道血液透析工作人員的HBV攜帶者和感染率顯著高于對照人群[4]。莊輝認(rèn)為，乙肝流行病學(xué)特征發(fā)生改變，主要與以下因素有關(guān)：不同乙肝病毒流行區(qū)之間的人口流動增加；社會經(jīng)濟(jì)狀況改善，醫(yī)療服務(wù)項目增加，增加了醫(yī)源性傳播；

1.1經(jīng)血液或血制品傳播

輸入被HBV污染的全血、血清、血漿、血小板、凝血因子，注射或輸入人免疫球蛋白等血液制品都會引起乙肝傳播。上海市的12所醫(yī)院中，在透析室經(jīng)兩次透析的病人100%感染了乙肝[4]。